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猪人工输精技术
日期:2007年5月29日 新闻来源:畜牧兽医专业网 作者: 新闻阅读次数:

一、前言
    中国有名俗话:“母猪好,好一窝;公猪好,好一坡。”这句话有力地说明了,虽然公猪和母猪在后裔 的遗传中各占百分之五十的影响力,但在正常自然交配的情况下,一头公猪可与许多头母猪配种,而一头母 猪只能与一、二头公猪配种,一年产2.0~2.4胎,可见,公猪要比母猪重要得多。若优良的公猪得到充分利 用对后代的影响,那么将会给养猪企业带来数倍甚至数十倍的利益。在自然交配的情况下,一头公猪一年最   多能负担25~30头母猪的配种任务,显然,公猪的使用效率尚未充分发挥,那么,如何充分发挥优良公猪的 作用呢?猪的人工授精技术广泛使用为此提供了可能。
二、人工授精技术的发展历史
    猪的人工授精研究,是从公元1780年意大利的科学家司拜伦瑾尼第一次对母猪进行人工授精获得成功后,在   世界各地便开始了家畜(主要是牛、猪等)的人工授精试验。目前使用面积较广的美国,人工授精技术的应用开始于二十世纪七十年代,普及率目前达到30~50%;有专业人士估计,下世纪初,美国人工授精的普及率将达80%以上。欧洲猪人工授精技术的发展,是在公元1967年新西兰爆发口蹄疫后才逐步加速的。我国的猪人工授精技术,从五十年代开始试验,到六十年代以后转入应用,并在不少省份推广普及,主要以外国品种的种猪与地方猪杂交为主,该技术在我国有着较广泛的基础,但随着改革开放的到来,由于外品种猪的引入 和集约化养猪规模的不断扩大,人工授精技术因众多的原因逐步被荒芜了。到了九十年代,在华南的   广 东、广西等省、区,人工授精技术逐步被集约化大型养猪企业所认可和使用,并呈现出良好的发展趋势。
三、人工授精的优、缺点
    猪人工授精技术是以种猪的培育和商品猪的生产为目的而采用的最简单有效的方法,是进行科学养猪、实现养猪生产现代化的重要手段。它有如下优点:
1、提高优良公猪的利用率,促进品种改良和提高商品猪质量及其整齐度
    在自然交配的情况下,一头公猪一年负担25~30头母猪的配种任务,繁殖仔猪600~800头;而采用人工授精技术,一头公猪可负担800~1500头母猪的配种任务,繁殖仔猪一万头以上。对于优良的公猪,可通过人工授精技术,将它们的优质基因迅速推广,促进种猪的品种品系改良和商品猪生产性能的提高。同时,可将差的公猪淘汰,留优汰劣,减少公猪的饲养量,从而减少养猪成本,达到提高效益的目的。
2、克服体格大小的差别,充分利用杂种优势
    在自然交配的情况下,一头大的公猪很难与一头小的母猪配种,反之亦然,根据猪的喜好性,相互不喜欢的公母猪也很难进行配种,这样,对于优秀公猪的保种(要指定配种)和种猪品质的改良,都将造成一定的困难,对于商品场来说,利用杂种优势,培育肥育性能好、瘦肉率高、体型优秀的商品猪,特别是出口猪,也将会造成一定的困难。而利用人工授精技术,只要母猪发情稳定,就可以克服上述困难,根据需要进行配种,这样有利于优质种猪的保种和杂种优势作用的充分发挥。
3、减少疾病的传播
    进行人工授精的公母猪,一般都是经过检查为健康的猪只,只要严格按照操作规程配种,减少采精和精液处理过程中的污染,就可以减少部分疾病特别是生殖道疾病(不能通过精液传播的疾病)的传播,从而提高母猪的受胎率和产仔数。但部分通过精液传播的疾病,如感染口蹄疫、非洲猪瘟、猪水疱病等。但还没表现出症状之前的公猪和携带伪狂犬病毒、猪细小病毒的公猪,采用人工授精时,均可进行传染。故对进行人工授精的公猪,应进行必要的疾病检测。
4、克服时间和区域的差异,适时配种
    自然交配时,由于母猪发情但没有公猪可利用,或需进行品种改良但引进公猪又较困难的现象时时困扰着养猪界人士。而采用人工授精,则可将公猪精液进行处理保存一定时间,可随时给发情母猪输精配种,可以不引进公猪而购买精液(或冻精),携带方便,经济实惠,并能做到保证质量和适时配种,从而促进养猪业社会效益和经济效益的提高。
5、节省人力、物力、财力,提高经济效益
    人工授精和自然交配相比,饲养公猪数量相对减少,节省了部分人工、饲料、栏舍及资金,既使重新建立一座合适的公猪站,但总的经济效益还是提高了;若单纯买猪精,将会创造出更多的经济效益。
    人工授精的缺点:如果本身生产水平不高,技术不过关,很可能会造成母猪子宫炎、受胎率低和产仔数少的情况。建议先学技术,后进行小规模人工授精试验,或自然交配与人工授精结合,随着生产水平和技术的不断提高,再进行推广。
四、公猪站的建立
    公猪站是饲养人工授精用公猪、采精和精液处理保存的地方,为防止疾病的传播和外界人为的干扰,公猪站应相对独立。
1、公猪舍:在美国,公猪舍包括公猪栏和采精室,公猪栏有定位栏和活动栏,美国业内人士表示,经他们研究,定位栏饲养公猪和活动栏相比,在公猪的性欲、精液品质、利用年限等方面均没有明显的区别。在我国,公猪栏大多采用活动栏,四周用砖砌墙,猪栏面积4.5~6.0平方米。室外面有单独运动场,因南方夏季气温较高,持续时间长,故最好采用封闭式水帘降温措施;北方冬季气温较低,也应做好公猪的保暖工作,使猪舍温度维持在25℃左右。根据需要,一个公猪站可存栏25~200头公猪。
2、采精室:采精室一般在公猪舍的一端,为独立的房间,是用来集采精液的地方。采精室内有一个固定假台猪,上面应有公猪精液味或母猪尿液味等特殊气味以吸引公猪爬跨。采精室面积可为2.5×2.5平方米,或为3.0×3.0平方米,太大或太小均不适用。假台畜一般固定在采精栏的中央或一端靠墙。在我国,以一端靠墙较为方便,可以避免公猪围着母猪台转圈而难于爬跨。地面的一端应略有坡度,便于排除公猪尿液等,并在母猪台后面或周围铺设防滑地板胶,其余地面不应太光滑,以免公猪行走或爬跨时跌伤,损坏趾蹄。采精室还要设置采精人员安全区,使工作人员在公猪发怒或咬人时便于躲避,安全区一般设在采精栏的四个角或与母猪台平行的靠墙两侧,周围用水泥柱或粗钢管竖起,使人可自由出入而公猪头部却不能进入。假台畜的个数与公猪头数成比例,一般30~50头公猪/个。
3、精液处理室:是用来对公猪精液进行检查、稀释、保存的地方,与采精室紧密相连。二者通过墙壁上的窗口相互传递采精杯及精液,但美国有些处理室与采精室、公猪舍相隔100米左右,精液是通过真空泵传递至处理室的,它的优点是防止猪舍污染处理室,除工作人员外,精液处理室不允许其他人员出入,也禁止吸烟,因它是无菌室,卫生环境要求特别严格。要求干净卫生,易清洁,地面易清洗,窗子应装不透光的窗帘,有条件的话,可安装空调,做到夏季控温、冬季保暖的原则,墙壁要安装足够的插座及电源开关,因精密仪器较多,为防止雷电等,最好安装地线,并辅助建立工作台、洗水池等。精液处理室分为处理保存室和清洗室,中间可用透明的铝合金玻璃窗隔开,前者主要用于对精液进行检查,稀释和保存,后者用于清洗用过的仪器及分送精液。
精液处理室主要需要如下设备和用具:
显微镜(最好是配有摄像显示屏系统的位相差显微镜)
双蒸水器 磁力搅拌器
干燥箱 37℃恒温板
普通冰箱 集精杯(可用保温杯代替)
16~18℃恒温冰箱(可用普通冰箱改造)
聚乙烯塑料袋或食品保鲜袋
精子密度仪(可用国产分光光度仪代替,也可用红血球稀释吸管和计数器计密度)
输精管(一次性或多次性的)
精密电子天平 输精瓶(袋)
多孔水浴锅 聚乙烯手套(一次性)
精液分装设备 精密温度计
量筒 量杯烧杯 漏斗
沙布 滤纸
玻璃棒 剪刀
药匙 载、盖玻片
其它如毛巾、洗衣粉、脱脂棉、润滑脐等
所需(配制稀释剂,也可买现成的)药品如下:
葡萄糖 柠檬酸钠
碳酸氢钠 EDTA
氯化钾 青霉素
链霉素 庆大霉素(少用)
    在我国,第一家公猪站是一九九八年在广州成立的广东省广州种猪精液中心,它是首家面向全社会提供优质种猪精液的服务性机构。目的是与广东省种猪测定中心相配合,推动全省及整个社会养猪业的品种改良工作。种公猪饲养设计规模为100头,前期饲养60头,一年可向社会提供优良种公猪精液18万头份,可满足4.0~4.5万头母猪需要,种公猪品种有长白、大约克、杜洛克等。
    目前,国内已有很多地方出售精液稀释剂,多以粉状的稀释剂为主,养猪企业既可自己配制,也可购卖现用。

人工授精技术之二:公猪的训练

    

瘦肉型后备公猪一般4~5月龄开始性发育,而7~8月龄左右进入性成熟。国内一般的养猪企业,后备公猪6月龄左右体重达90~100KG时结束测定,此时是决定公猪去留的时间,但还不能进行采精调教。准备留作采精用的公猪,从7~8月龄开始调教,效果比从6月龄就开始调教要好得多,一是缩短调教时间;二是易于采精。英国的一项研究表明:十月龄以下的公猪调教成功率为92%,而10~18月龄的成年调教成功率仅为70%,故调教时间也不能太晚。
    进行后备公猪调教的工作人员,要有足够的耐心,遇到自己心情不好,时间不充足或天气不好的情况下不要进行调教,因这时感情充沛的人容易将自己的坏心情强加于公猪身上而达到发泄的目的。
    对于不喜欢爬跨或第一次不爬跨的公猪,要树立信心,多进行几次调教。不能动不动就打公猪或用粗鲁的动作干扰公猪。若调教人员态度温和,方法得当,调教时自己发出一种类似母猪叫声的声音或经常抚摸公猪,久而久之,调教人员的一举一动或声音都会成为公猪行动的指令,并顺从地爬跨母猪台、射精和跳下母猪台。显然,一个成功的采精人员是和自己的素质分不开的。
    调教时,应先调教性欲旺盛的公猪。公猪性欲的好坏,一般可通过咀嚼唾液的多少来衡量,唾液越多,性欲越旺盛。对于那些对假母猪台或母猪不感兴趣的公猪,可以让它们在旁边观望或在其它公猪配种时观望,以刺激其性欲的提高。
    对于后备公猪,每次调教的时间一般不超过15~20分钟,每天可训练一次,但一周最好不要少于3次,直至爬跨成功。调教时间太长,容易引起公猪厌烦,起不到调教效果。调教成功后,一周内每隔1天就要采精一次,以加强其记忆。以后,每周可采精一次,至12月龄后每周采两次,一般不要超过三次。
    后备公猪调教的方法通常用的有如下几种:
1、爬跨母猪台法
    调教用的母猪台高度要适中,以45~50CM为宜,可因猪不同而调节,最好使用活动式母猪台。调教前,先将其它公猪的精液或其胶体或发情母猪的尿液涂在母猪台上面,然后将后备公猪赶到调教栏,公猪一般闻到气味后,大都愿意啃、拱母猪台,此时,若调教人员再发出向类似发情母猪叫声的声音,更能刺激公猪性欲的提高,一旦有较高的性欲,公猪慢慢就会爬母猪台了。如果有爬跨的欲望,但没有爬跨,最好第二天再调教。一般1~2周可调教成功。
2、爬跨发情母猪法    调教前,将一头发情旺期的母猪用麻袋或其它不透明物盖起来,不露肢蹄,只露母猪阴部,赶至母猪台旁边,然后将公猪赶来,让其嗅,拱母猪,刺激其性欲的提高。当公猪性欲高涨时,迅速赶走母猪,而将涂有其它公猪精液或母猪尿液的母猪台移过来,让公猪爬跨。一旦爬跨成功,第二、三天就可以用母猪台进行强化了,这种方法比较麻烦,但效果较好。
    无论哪种调教方法,公猪爬跨后一定要进行采精,不然,公猪很容易对爬跨母猪台失去兴趣。调教时,不能让两头或以上公猪同时在一起,以免引起公猪打架等,影响调教的进行和造成不必要的经济损失。

人工授精技术之三:采精

   经训练调教后的公猪,一般一周采精一次,12月龄后,每周可增加至2次,成年后2~3次。在美国,10月龄之前每周采精1次;10~15月龄每2周采精3次;15周龄以上每周采精2次。实践表明,一头成年公猪一周采精一次的精液量比采三次的低很多,但精子密度和活力却要好很多,因精子的发生大约需要42天完成。采精过于频繁的公猪,精液品质差,密度小,精子活力低,母猪配种受胎率低,产仔数少,公猪的可利用年限短;经常不采精的公猪,精子在附睾贮存时间过长,精子会死亡,故采得的精液活精子少,精子活力差,不适合配种。故公猪采精应根据年龄按不同的频率采精,不能因人而宜,随意采精。
    无论采精多少次,一旦根据母猪的多少而定下来采精次数,那么采精的时间应有规律。比如,一头公猪按规定一周只在星期三采一次,那么到下周一定要在周三采,依次类推;另一头公猪按规定在星期二、星期五各采精一次,到下一周也要在星期二、星期五采,依次类推,不能随意更换时间。因为精子的形成和成熟,类似于人的生物钟,有一定的规律,一旦更改,便会影响精液的品质。
    采精用的公猪的使用年限,美国一般为1.5年,更新率高;国内的一般可用2~3年,但饲养管理要合理、规范。超过4年的老年公猪,由于精液品质逐渐下降,一般不予留用。
一、采精前的准备
    采精一般在采精室进行,并通过双层玻璃窗口与精液处理室联系,采精前应进行如下的准备:
1、将盛放精液用的食品保鲜袋或聚乙烯袋放进采精用的保温杯中,工作人员只接触留在杯外的袋的开口出处,将袋口打开,环套在保温杯口边缘,并将消过毒的四层沙布罩在杯口上,用橡皮筋套住,连同盖子,放入37℃的恒温箱中预热,冬季尤其应引起重视。采精时,拿出保温杯,盖上盖子,然后传递给采精室的工作人员;当处理时距采精室较远时,应将保温杯放入泡沫保温箱,然后带到采精室,这样做可以减少低温对精子的刺激。
2、公猪的准备:采精之前,应将公猪尿囊中的残尿挤出,若阴毛太长,则要用剪刀剪短,防止操作时抓住阴毛和阴劲而影响阴劲的勃起,以利于采精。用水冲洗干净公猪全身特别是包皮部,并用毛巾擦干净包皮部,避免采精时残液滴或流入精液中导致污染精液,也可以减少部分疾病传播给母猪,从而减少母猪子宫炎及其它生殖道或尿道疾病的发生,以提高母猪的情期受胎率和产仔数。3、采精室的准备:采精前先将母猪台周围清扫干净,特别是公猪精液中的胶体,一旦残落地面,公猪走动很容易打滑,易造成公猪扭伤而影响生产。安全区应避免放置物品,以利于采精人员因突发事情而转移到安全地方。采精室内避免积水、积尿,不能放置易倒或能发出较大响声的东西,以免影响公猪的射精。

二、采精的方法
    公猪精液的获得,一般有两种采取方法,即假阴道采精法和徒手采精法。但目前最常用的为后一种方法。
1、假阴道采精法:即制造一个类似假阴道的工具,利用假阴道内的压力、温度、湿润度和母猪阴道类似的原理来诱使公猪射精而获得精液的方法。
    假阴道主要由阴道外筒、内胎、胶管漏斗、气嘴、双连球和集精杯等部分组成。外筒上面有一个小注水孔,可用来注入45~50℃的温水,主要用于调节假阴道内的温度,使其维持在38~40℃。再用润滑剂将内胎由外到内涂均匀,增加其润滑度,后用双连球进行充气,增大内胎的空气压力,使内胎具备类似母猪阴道壁的功能。假阴道一端为阴劲插入口,另一端则装一个胶管漏斗,以便将精液收集到集精杯内。
    这种采精方法不只用在猪上,其它家畜采精时也有广泛的应用,它是一种历史较长的先进采精方法,过去很长时间内曾被国内外广泛采用。但这种方法使用起来比较麻烦,所需设备多,在现阶段猪人工授精技术普遍使用的情况下,显然不利于生产,故国内外目前使用范围不大。
2、徒手采精法;这种方法目前在国内外养猪界被广泛应用,因它是劳动人民智慧的结晶,是根据自然交配的原理而总结的一种简单、方便、可行的方法。使用这种方法,所需设备如采精杯、手套、纱布等简单,不需特制设备,操作简便。
    这种方法的优点主要是可将公猪射精的前部分和中间较稀的精清部分弃掉,根据需要取得精液,缺点是公猪的阴劲刚伸出和抽动时,容易造成阴劲碰到母猪台而损伤龟头或擦伤阴劲表皮,以及搞不好清洁而易污染精液。
    具体做法如下:将采精公猪赶到采精室,先让其嗅、拱母猪台,工作人员用手抚摸公猪的阴部和腹部,以刺激其性欲的提高。当公猪性欲达到旺盛时,它将爬上母猪台,并伸出阴劲龟头来回抽动。此时,若采精人员用右手采精时,则要蹲在公猪的左侧,右手抓住公猪阴劲的螺旋头处,并顺势拉出阴劲,顺势稍微回缩,直至和公猪阴劲同时运动,左手拿采精杯;若用左手采精时,则要蹲在公猪的右侧,左手抓住阴劲,右手拿采精杯。这样做使采精人员面对公猪的头部,主要是能够注意到公猪的变化,防止公猪突然跳下时伤到采精人员,同时,当采精人员能发出类似母猪发情时的“呼呼”声时,因声音和母猪接近,对刺激公猪的性欲将会有很大的作用,有利于公猪的射精。
    无论用左手或右手,当握住公猪的阴劲时,都要注意要用拇指和食指抓住阴劲的螺旋体部分,其余三个手指予以配合,象挤牛奶一样随着阴劲的勃动而有节律地捏动,给予公猪刺激。采精时,握阴劲的那只手一般要戴双层手套,最好是聚乙烯制品,用这种手套对精子杀伤力较小,当将公猪包皮内的尿液挤出后,应将外层手套去掉,以免污染精液或感染公猪的阴劲。
    手握阴劲的力度,太大或大小都不行,应以不让其滑落并能抓住为准。用力太小,阴劲容易脱掉,采不到精;用力太大,一是容易损伤阴劲,二是公猪很难射出精液。公猪一旦开始射精,手应立即停止捏动,而只是握住阴劲,射精完后,应马上捏动,以刺激其再次射精。

    当公猪射精时,一般射出的前面较稀的精清部分应弃去不要,当射出乳白色的液体时,即为浓精液,就要用采精杯收集起来,射精的过程中,公猪都会再次或多次射出较稀的精清,和最后射出的较为稀薄的部分、胶体都应弃去不要。精液品质的好坏,量的多少只是其中的一个衡量指标,在相同的取舍方法下,关键要看精子的密度和活力的高低。初学者大都将公猪射出的较稀的精清和浓的精液全部收集起来计量,以此来衡量公猪的好坏,这是不恰当的。因为,同品种的不同公猪及不同品种的公猪在射精量和精子浓度方面都有个体的差异,尤以不同品种公猪之间较为突出,如大约克的射精量大,但浓度稀;杜洛克公猪的射精量小,但浓度高。因此,在相同的采精方法下,应以精子密度、活力为主进行评价,而精液量只是其中一个标准。
    应注意的是,采精杯上套的四层过滤用纱布,使用前不能用水洗,若用水洗则要烘干,因水冼后,相当于采得的精液进行了部分稀释,既使水分含量较少,也将会影响精液的浓度。
    采完精液后,公猪一般会自动跳下母猪台,但当公猪不愿下来时,可能是还要射精,故工作人员应有耐心。对于那些采精后不下来而又不射精的公猪,不要让它形成习惯,应赶它下母猪台。对于采得的精液,先将过滤纱布及上面的胶体丢掉,然后将卷在杯口的精液袋上部撕去(美国做法),或将上部扭在一起,放在杯外,用盖子盖住采精杯,迅速传递到精液处理室进行检查、处理。 

  人工授精技术之四:精液的检查、处理和保存

    

精液的品质检查、稀释处理和保存,均在精液处理室进行,除了本处理室工作人员外,其它人员禁止入内。
一、精液品质的检查
    由采精室递过来的精液,要马上进行鉴定,以便决定可否留用,从而保证母猪的受胎率和产仔数的提高。检查精液的主要指标有如下几个:精液量、颜色、气味、精子密度、精子活力、酸碱度、粘稠度、畸形精子率等。每一份经过检查的公猪精液,都要有一份详细的检查记录,以备对比及总结。
    检查前,将精液转移到在37℃水浴锅内预热的烧杯中,或直接将精液袋放入37℃水浴锅内保温,以免因温度降低而影响精子活力。整个检查活动要迅速、准确,一般在5~10分钟内完成。
1、精液量:后备公猪的射精量一般为150~200毫升,成年公猪的为200~300毫升,有的高达700~800毫升。精液量的多少因品种、品系、年龄、采精间隔、气候和饲养管理水平等不同而不同。
2、颜色:正常精液的颜色为乳白色或灰白色,精子的密度愈大,颜色愈白;越小,则越淡。如果精液颜色有异常,则说明精液不纯或公猪有生殖道病变,如呈绿色或黄绿色时则可能混有化脓性的物质;呈红色时则有新鲜血液;呈褐色或暗褐色时则有陈旧血液及组织细胞;呈淡黄色时则可能混有尿液等。凡发现颜色有异常的精液,均应弃去不用,同时,对公猪进行对症处理、治疗。
3、气味:正常的公猪精液含有公猪精液特有的微腥味,这种腥味不同于鱼类的腥味,没有腐败恶臭的气味。有特殊臭味的精液一般混有尿液或其它异物,一旦发现,不应留用,并检查采精时是否有失误,以便下次纠正做法。
 4、酸碱度:可用PH试纸进行测定。公猪精液的酸碱度一般呈弱碱性或中性,其酸碱度与精子密度呈负相关的关系,PH值越接近中性或弱酸性,则精子密度越大,但过酸过碱都会影响精子的活力。
5、粘稠度:精液粘稠度的高低,与精子密度密切相关,精子密度越高的精液,则粘稠度也高,精子密度小的精液,粘稠度也小。
6、精子密度:指每毫升精液中含有的精子量,它是用来确定精液稀释倍数的重要依据。正常公猪的精子密度为2.0~3.0亿/毫升,有的高达5.0亿个精子/毫升。精子密度的检查方法有以下几种:
①、白细胞稀释吸管计数法:这种方法是用手动计数器和血细胞计数板来统计精子密度的。目前,在国内应用较多,成本低,计算较准确,但所用时间多,使用效率低。
    主要做法是先用红血球稀释吸管取精液到球下的0.5(稀释200倍)或1.0刻度处(稀释100倍),然后再吸取注射用生理盐水到膨大部上方的101刻度处,用两指(拇指和食指或中指)紧紧压住吸管的两端进行摇动混合均匀,吸取的过程中,不允许有空气混入吸管,以免影响准确度。摇均后,将吸管未端的液体擦干,并去掉前几滴混合液,然后顺着盖有盖玻片的血细球计数板的边缘,让混合液渗入到计数板内,再通过显微镜观察,用计数器点数,这种检查一般为总精子数。然后利用公式计算每毫升精子的密度。精子密度的计算公式为:
    全方格内的精子数×10(厚度的倍数)×稀释倍数(100或200)×1000=精子数/毫升
②、简单检查密度法:这种方法不用计数,用眼观察显微镜下精子的分布,精子所覆盖的面积大过空间面积的为“密”,小于空间面积的为“稀”,介于二者之间的为中等。一般只用密和中等的精液,稀的应弃去。这种方法简单,但对于不同检查人员而言,主观性强,误差较大,只能对公猪进行粗略的评价,故大型养猪场一般不采用这种方法,只适应个体户或人工授精数量少的猪场。
③、用精子密度仪计算精子密度:美国和欧洲等养猪业发达的国家多采用这种方法,它极为方便,检查时间短,准确率高,使用寿命长,但价格较贵,一般国外进口都在一万元人民币以上,但若用国产分光光度计改装,也较为适用。
    它有两种类型:一是德国的精子密度仪,它是将原精液滴一滴在一个一次性的特制塑料板上,然后通过仪器直接测量精子的密度,这种方法一般要先进密度仪的校正;另一种是利用光电比色法,以精子对光通透性差为依据,用分光光度计读出一个数字,然后再根据事先准备好的标准曲线确定精子的密度。这两种类型都 有一个缺点,就是会将精液中的异物按精子来计算。
    用精子密度仪检查精子密度,将是国内外猪人工授精人员较好的选择。
7、精子活力:精子活力的高低关系到配母猪受胎率和产仔数的高低,因此,每次采精后及使用精液前,都要进行活力的检查,以便确定精液能否使用及如何正确使用。

    精子活率的检查必须用37℃左右的保温板,以维持精子的温度需要。一般先将载玻片和盖玻片放在保温板上预热至37℃左右后,再滴上精液,在显微镜下进行观察。若有条件,可在显微镜上配置一套摄像显示仪,将精子放大到电脑屏幕上进行观察。在我国精子活力一般采用10级制,即在显微镜下观察一个视野内的精子运动,若全部直线运动,则为1.0级;有90%的精子呈直线运动则活力为0.9;有80%的呈直线运动,则活力为0.8,依次类推。鲜精液的精子活率以高于0.7为正常,使用稀释后的精液,当活力低于0.6时,则应弃去不用。
8、畸形精子率:畸形精子指断尾、断头、有原生质、头大的、双头的、双尾的、折尾等精子,一般不能直线运动,虽受精能力较差,但影响精子的密度。若通过摄像显示仪观察,则很容易区分。若用普通显微镜观察,则需染色;若用位相差显微镜,则可直接观察。公猪的畸形精子率一般不能超过20%,否则应弃去。
二、精液的处理
    经过检查的精液,差的弃去,留品质好的进行稀释处理。优良公猪利用率的高低,关键在于处理保存的好坏。处理后的精液和原精液相比,一是扩大了与配母猪头数,能迅速将优秀公猪基因推广开来;二是增加了精液的营养成分,有利于精液的保存;三是便于运输。
    处理精液必须在恒温的环境中进行,检查品质后的精液和稀释液都要在37℃恒温下预热,二者温度上下不能超过1℃,否则会对精子造成应激。处理时,应严禁太阳光直射精液,因阳光对精子有一定的杀伤力。所用的稀释水应是经检查有害物质不超标的纯净水或蒸馏水,最好采用双蒸水,但因水源不同,精液中精子对不同品质的水有一定的选择性。稀释液一般要在采精前准备好,并进行预热。 

人工授精技术之五:稀释与分装

 
一、稀释液的准备
   稀释剂有多种配方,分短期保存和长期保存稀释液等,短效稀释剂一般要在3天内使用,否则效果较差。长效的可保存5~8天,但配种受胎率及母猪产仔数不及短效稀释液。常常用稀释剂配方如下:

保存天数 3                      
 3   5 
类型 K I E V B T S 20r P V a 
葡萄糖(g) 6.000 3.700  1.150 
柠檬酸钠(g) 0.37  0.60  1.165 
碳酸氢钠(g) 0.12  0.125 0.175 
乙二胺四乙酰二钠(EDTA)  0.37  0.125  0.235 
氯化钾(g)   0.075  1 
青霉素(IU/ML) 500 500 0.69 
链霉素(MG/ML) 0.5  0.5  1.09 
蒸馏水加至(ML)  100  100  100 
    配制稀释剂要用精密电子天平,精确度越高越好。对于以上药品,可采用分析纯药品。
    配制好的稀释剂,在采精前用双蒸水进行混合溶化,可用磁力搅拌器以促进溶解。溶解完后,用滤纸进行过滤,以除去杂质,因精子有亲异物性,若有异物则容易聚头。然后,在水浴锅内进行预热,以备使用,也可配制好后先贮存,但要在24小时内使用完。
    抗生素的添加,应在稀释精液时加入到稀释液,太早易失去效果。
二、精液稀释头份的确定
    稀释前,应对自己所需稀释的精液头份进行确定。稀释头份可按如下方法进行计算:人工授精的正常剂量一般为30~50亿个精子/1个剂量,体积为80~100ML,美国一般采用30亿/80ML.头份,我国一般采用40亿左右/100ML.头份,不过,这主要是根据实际情况而定。正常的公猪精液,假如密度为2亿/ML,采精量为150ML,并计划稀释后密度为40亿/100ML.头份。则此公猪精液可稀释150×2/40=7.5头份,即需加(750150)ML=600ML稀释液。不过,同一种稀释液,精子密度越大,因所消耗能量多,保存时间也就越短。
三、精液的稀释
    稀释前,稀释液的温度应和精液接近,相差不能超过1℃。根据计算好的稀释头份,用量杯量取稀释液的体积,或简单一点,按1ML精液或稀释液约等于1克,用精密电子天平直接称量,国外专业公猪站多采用此法。
    稀释时,将稀释液顺着盛放精液的量杯壁慢慢注入精液,并不断用玻璃棒搅拌,以促进混合均匀;不能将稀释液直接倒入精液,因精子需要一个适应过程。还有的做法是,先将稀释液慢慢注入精液一部分,搅拌均匀后,再将稀释后的精液倒入稀释液中,这样有利于提高精子的适应能力和稀释精液的均匀混合。
    精液稀释的成败,与所用仪器的清洁卫生有很大关系。所有使用过的烧杯、玻璃棒及温度计,都要及时用蒸馏水洗涤,并进行高温消毒,是稀释后的精液能保证适期保存、利用的重要条件。
四、稀释后精液的分装
    精液的分装,有瓶装和袋装两种,装精液用的瓶子和袋子均为对精子无毒害作用的塑料制品。瓶装的精液分装时简单方便,易于操作,但输精时需人为挤、压或瓶底开口,因瓶子有一定的固体形态;袋装的精液分装一般需要专门的精液分装机,用机械分装、封口,但输精时因其较软,一般不需人为挤压。瓶子一般上面均有刻度,最高一刻度为100ML,袋子一般为80ML。
    分装后的精液,要逐个粘贴标签,一般一个品种一个颜色,便于区分。注意要在上面标明公猪耳号、采精处理时间、稀释后密度、经手人等,并将以上各项登记到记录本上,以备查验。
五、稀释后精液的保存
    分装后的精液,不能立即放入17℃左右的恒温冰箱内,应先留在冰箱外1小时左右,让其温度下降,以免因温度下降过快而刺激精子,造成死精子等增多。
    放入冰箱时,不同品种的公猪精液应分开放置,否则匆忙中容易拿错精液。不论是瓶装的或是袋装的,均应平放,并可叠放。从放入冰箱开始,每隔12小时,要摇匀一次精液,因精子放置时间一长,会大部分沉淀。对于一般猪场来说,可在早上上班,下午下班时各摇匀一次。为了便于监督,每次摇动的人都应有摇动时间和人员的记录。
    保存过程中,一定要时时注意冰箱内温度计的变化,以免因意想不到的原因而造成电压不稳而导致温度升高或降低。
六、精液的运输
    对于远距离购精液的猪场,运输的过程是一个关键的环节。保温或防暑条件做得好的,运到几千公里之外,精子活力等还较强,使用效果还是很好,母猪受胎率和产仔数也仍很高;做得不好的,就是同一场内不同时间、地点使用,死精率也是很高,使用效果很差。高温的夏天,一定要在双层泡沫保温箱中放入冰皇(17℃恒温),再放精液进行运输,以防止天气过热,死精太多,严寒的季节,要用保温用的恒温乳胶或棉花等在保温箱内保温。
    使用冻精,运输时要用液氮罐,因这种技术难度较大,除了国外使用较广外,在猪方面,国内应用还不广泛,故不作详细的介绍。

人工授精技术之六:输精

    输精是人工授精技术的最后一关,输精效果的好坏,关系到母猪情期受胎率和产仔数的高低,而输精管插 入母猪生殖道部位的正确与否,则是输精的关键。      
一、发情母猪的鉴定
    母猪的发情,后备猪比生产母猪难于鉴定,长白母猪比大约克、杜洛克母猪等难于鉴定。一般可通过下面 的方法进行鉴定:  
    发情的母猪,外阴开始轻度充血红肿,后较为明显,若用手打开阴护,则发现阴护内表颜色由红到红紫的    变化,部分母猪爬跨其它母猪,也任其它母猪爬跨,接受其它猪只的调情,当饲养员用手压猪背时,母猪会   由不稳定到稳定,当赶一头公猪至母猪栏附近时,母猪会表现出强烈的交配欲。当母猪阴护呈紫红色,压背   稳定时,则说明母猪已进入发情旺期。
    对于集约化养猪场来说,可采用在母猪栏两边设置挡板,让试情公猪在两挡板之间运动,与受检母猪沟 通,检查人员进入母猪栏内,逐头进行压背试验,以检查发情程度,这种方法在美国常被采用。
二、适时输精
    进行母猪授情时,新鲜精液和保存精液有一个时间的差别。新鲜精液因精子活力强,死精率低,故配种时 母猪受胎率高;保存精液随着保存时间的延长,精子活力逐渐变弱,死精子数增多,母猪受胎率偏低。一般 地,上午发现站立反应的母猪,下午应输精一次,第二天下午再进行第二次输精;下午发现站立反应的母    猪,第二天上午输精一次,第三天上午再进行第二次输精。在美国,一般会因精液的性质不同而改变适时输     精时间。美国的做法如下:
    母猪断奶后站立反应和输精时间的关系
断奶至
出现发
情时间 
输 精 时 间 
每 天 2 次 发 情 鉴 定 
每天1次发情鉴定 
上午(7:00~9:00) 下午(7:00~9:00)  上午(7:00~9:00) 
鉴 定 发 情  鉴 定 发 情  鉴 定 发 情 
输精2次  输精3次  输精2次  输精3次  输精2次  输精3次 
    注:两次输精时间间隔至少8小时;发现发情为第一天,“上午1”指发情的第一天上午,输精时间为7:00~ 9:00;“上午2”指发情的第二天上午;“下午1”指发情的第一天下午,输精时间为3:005~:00, “下午  2”指发情第二天下午。
三、输精的准备
    输精前,精液要进行镜检,检查精子活力,死精率等。对于死精率超过20%的精液不能使用。对于多次重复   使用的输精管,要严格消毒、清洗,使用前最好用精液洗一次。母猪阴部冲洗干净,并用毛巾擦干,预防将细菌等带入阴道。
四、输精管的选择
   输精管有一次性的和多次性的两种。
    一次性的输精管,目前有国外产的台湾省产的,有螺旋头型和海棉头型,长度约有50~51CM。螺旋头一般 用无副作用的橡胶制成,适合于后备母猪的输精;海棉头一般用质地柔软的海棉制成,通过特制胶与输精管   粘在一起,适合于生产母猪的输精。选择海棉头输精管时,一应注意海棉头粘得牢不牢,不牢固的则容易脱    落到母猪子宫内;二应注意海棉头内输精管的深度,一般以0.5CM为好,因输精管在海棉头内包含太多,则输       精时因海棉体太硬而损伤母猪阴道和子宫壁,包含太少则因海棉头太软而不易插入或难于输精。一次性的输     精管使用方便,不用清洗,但成本较高,大型集约化养猪场一般采用此种方法。 
    多次性输精管,一般为一种特种特制的胶管,因其成本较低可重复使用而较受欢迎,但因头部无膨大部或 螺旋部分,输精时易倒流,并且每次使用均应清洗、消毒,若保管不好还会变形。
五、输精方法
    输精时,先将输精管海棉头用精液或人工授精用润滑胶润滑,以利于输精管插入时的润滑,并赶一头试情公   猪在母猪栏外,刺激母猪性欲的提高,促进精液的吸收。
    用手将母猪阴蠢分开,将输精管沿着稍斜上方的角度慢慢手插入阴道内。当插入25~30厘米左右时,会感到有上点阻力,此时,输精管顶着已到了子宫颈口,用手再将输精管左右旋转,稍一用力,顶部则进入子宫颈第2~3皱折处,发情好的猪便会将输精管锁定,回拉时则会感到有一定的阻力,此时便可进行输精。
    用输精瓶输精时,当插入输精管后,用剪刀将精液瓶盖的顶端剪去,插到输精管尾部就可输精;精液袋输精 时,只要将输精管尾部插入精液袋入口即可。为了便于精液的吸收,可在输精瓶底部开一个口,利用空气压 力促进吸收。
    输精时输精人员同时要对母猪阴护或大腿内侧进行按摩,实践证明,大腿内侧的按摩更能增加母猪的性   欲.。在美国,输精人员倒骑在母猪背上,并进行按摩,效果也很显著。
    正常的输精时间应和自然交配一样,一般为3~10分钟,时间太短,不利于精液的吸收,太长则不利于工作的   进行。

    为了防止精液倒流,输完精后,不要急于拔出输精管,将精液瓶或袋取下,将输精管尾部打折,插入去盖的精液或袋孔内,这样即可防止空气的进入,又能防止精液倒流。
 人工授精技术之七:人工授精工作人员操作规程

    
操作规程从人工授精技术的需要出发,从采精到授精均有不同的要求。因各均情况不同,或操作规程仅供参考。
     凡从事猪的人工授精技术工作的人员,必须具备严谨的科学态度和认真的工作方法,并严格遵守以下规程。
一、采精 
    工作人员在7~9月份早上6:00上班,其它时间按正常上班时间上班。 
    每头后备公猪每周采精一次,生产公猪采精二次,必要时不得超过三次。 
    采精前先将公猪尿囊中的尿液挤出,然后清洗、消毒公猪的包皮部。若阴毛太长,必须剪短。 
    采精和训练后备公猪的过程中,工作人员态度要温和,切忌粗暴,更不能随意抽打公猪。 
    采精过程中的稀精和胶体部分均要弃去。 
    若发现采得的精液品质较差,在保证正常饲养条件下,对该公猪每隔两周检查一次精液,一个月后再决定去留。 
    负责测定舍后备公猪的训练、调教工作,直到能正确采到精液。 
每次采精必须有记录,并保持完整的采精记录。 
二、精液处理室
    主要负责精液的检查、稀释、保存等工作。除了工作人员,处理室不准其他人员出入,并禁止吸烟。 
对采精人员送回的原精液,要及时保温、检查,凡活力低于0.6或死精超过20%的一律弃去不用。 
    保证稀释液的科学配方,个人未经场部同意,不准随意更改。稀释后的精子密度在40~50亿个/100毫升之间。 
    稀释后的精液要能保存3天,且活力无明显下降。 
    精液瓶上要标明公猪品种、耳号、采精时间、密度、处理经手人等,否则配种人员有权拒用。 
精液贮存时,温度保持在17~18℃,并隔12小时摇动一次精液瓶,责任人要签名,记录时间。 
    每天每个品种要保持一定数量的精液,以备出售和临时使用。 
    精液使用前,要镜检精子的活力,活力低于0.6 或死精多的不准给配种人员使用。 
    遇到饲养员有人工授精方面的问题时,要认真、耐心,用科学的道理说服对方,不能凭直觉胡乱应付。 
    冰箱内严禁存放杂物和饮料。 
合理使用空调,早上上班打开,下午下班关掉。 
使用过的仪器、用具,如显微镜、电子天秤、密度仪等,要及时控拭、清洗,保持仪器、用具的清洁。 
    爱护公物,若有仪器或用具不慎损坏,要及时报告。 
做好登记公猪的品种、耳号、采精时间、处理前后的密度、活力、体积、去向等工作,要保证资料的准确性和科学性,做到有检必有记录。 
三、输精
    输精人员根据前一天各配种舍提供的需配母猪的情况,将精液送到目的地并输精。 
    纯种繁殖母猪,根据指定的可配公猪配种,严禁错配和近交。 
从处理室到输精地点,要用保温箱携带精液,以免外界温度过高或低而使精子受到应激。 
    输精前,要对母猪外阴进行清洗、消毒。 
    输精时间与自然交配相近,若太慢可在精液瓶底部开一小孔,利用空气压力输精。 
    为了防止精液倒流,输完精后输精管不要拉出,将其尾部打折,放入去盖的精液瓶中,让其自行脱落。 
    输精时要使用润滑剂。 
输精后,要及时记录母猪耳号,与配公猪耳号和输精时间,并登记到母猪记录卡上。 
以上各项,工作人员必须认真执行,视情节轻重进行处理。

 

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